Se extrae sangre de una vena (punción venosa) o se obtiene una muestra capilar de un talón, dedo de la mano o el pie o del lóbulo de la oreja. El laboratorio centrifuga la sangre para separar el suero de las células y se realiza la prueba de FA en el suero.

La persona no debe consumir alimentos durante un período de 6 horas y es probable que el médico aconseje suspender los medicamentos que pueden afectar el resultado del examen, tales como:

• Antibióticos
• Narcóticos
• Metildopa
• Propranolol
• Cortisona
• Alopurinol
• Antidepresivos tricíclicos
• Clorpromacina
• Anticonceptivos orales (píldoras para la prevención del embarazo)
• Analgésicos antiinflamatorios
• Andrógenos
• Tranquilizantes
• Algunas drogas antiartríticas
• Drogas orales antidiabéticas

La fosfatasa alcalina es una enzima que se encuentra en todos los tejidos. Los tejidos con concentraciones particularmente altas son, entre otros: el hígado, los conductos biliares, la placenta y el hueso. Puesto que los tejidos enfermos o deteriorados liberan enzimas en la sangre, las mediciones de fosfatasa alcalina en suero pueden ser anómalas en muchas condiciones que incluyen la enfermedad ósea y la enfermedad hepática. No obstante, la fosfatasa alcalina en suero también se eleva en algunas circunstancias normales (por ejemplo, durante el crecimiento normal del hueso) o como respuesta a diversas drogas.

Hay una gran variedad de enzimas FA llamadas isoenzimas, que pueden poseer estructuras un poco diferentes y se encuentran en distintos tejidos (por ejemplo, las isoenzimas de fosfatasa alcalina óseas y del hígado poseen diferentes estructuras) y se pueden cuantificar en forma separada en el laboratorio. Para diferenciar la ubicación del tejido dañado o enfermo en el cuerpo se debe realizar el examen de las isoenzimas de la FA.