Dos enzimas están comprometidas en la conversión de propionil CoA (formado del metabolismo aminoácido) a metilmalonil CoA; además, la biotina y la cobalamina (vitamina B12) se necesitan como cofactores. Las deficiencias hereditarias de las enzimas necesarias ocasionan anomalías metabólicas severas (cetoacidosis). Normalmente, el ácido metilmalónico y su precursor (el ácido propiónico) se encuentran en muy pequeñas cantidades en los líquidos corporales debido a que el metilmalonil CoA es convertido en succinil CoA, el cual es posteriormente metabolizado para producir energía o está comprometido en la síntesis de porfirinas. Cuando el metilmalonil CoA se acumula en un nivel anormal, se activa una enzima que lo convierte en ácido metilmalónico. Las venas y arterias varían en tamaño de un paciente a otro y de una parte del cuerpo a otra, por esta razón puede ser más difícil obtener una muestra de sangre de algunas personas que de otras.
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