Se obtiene una muestra de esputo producto de la tos. Se pide al paciente que induzca la tos profundamente y que expulse en un recipiente cualquier materia que provenga de los pulmones (esputo). En caso de no producirse esputo, algunas veces se realiza una broncoscopia. El espécimen, llamado frotis, se esparce sobre una lámina porta-objetos. Las células del espécimen se tiñen con un tinte, fucsina fenicada y adicionalmente se aplica calor y ácido a la muestra. Luego la muestra se tiñe de nuevo con azul de metileno y se examina la muestra preparada bajo el microscopio. Si la tinción revela micobacterias, se puede colocar la muestra en un medio de cultivo (a menudo, los especimenes se cultivan si no se observan micobacterias, ya que algunas veces los números son tan bajos que es difícil verlas).
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