Inicialmente, se inyecta un marcador (químico radiactivo que se acumula en el hígado y posteriormente se excreta con la bilis a la vesícula biliar) en una vena (generalmente en la articulación del brazo) y luego se realiza la gammagrafía. La persona se acuesta en una mesa boca-arriba (decúbito dorsal) debajo de la cámara de examen o equipo de gammagrafía. El escáner detecta los rayos gamma emitidos por el marcador y la imagen de los órganos en donde se encuentra dicho marcador se transmite a un computador. El computador muestra la imagen en el monitor y registra la información para referencia futura. Un técnico opera el computador y el escáner y monitorea los hallazgos. La prueba dura alrededor de 1 a 2 horas. La obtención de las imágenes requiere aproximadamente 1 minuto y se toman cada 5 a 10 minutos durante la primera media hora y luego cada 15 minutos durante los siguientes 90 minutos, si es necesario.
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